アクリルアミドゲル作製のお手軽レシピ・時短裏技
SDS-PAGEゲルを簡単に作製するレシピです。
分離ゲルにグリセロールを添加することで,分離ゲルと濃縮ゲルを一緒に固めることができます。ゲル作製にかかる時間と手間が省けるのでオススメです!
また、AllView PAGE Buffer®(製品コードDS520)を使うことでグラジェントゲルのような泳動が可能となり、電気泳動時間も短縮できます。
① 分離ゲル溶液(濃度:6%)の作製(ミニゲル2枚分)
| グリセロール | 1.5 ml |
|---|---|
| 超純水 | 6.55 ml |
| 1.5M Tris-HCl (pH 8.8) | 3.75 ml |
| 30% Acrylamide / Bis solution | 3.0 ml |
| 10% SDS | 0.15 ml |
| TEMED | 3.75 μl |
| 10% APS | 0.05 ml |
② 濃縮ゲル溶液(濃度:3%)の作製(ミニゲル2枚分)
| 超純水 | 3.9 ml |
|---|---|
| 0.5M Tris-HCl (pH 6.8) | 1.5 ml |
| 30% Acrylamide / Bis solution | 0.6 ml |
| 10% SDS | 0.06 ml |
| TEMED | 3 μl |
| 10% APS | 0.06 ml |
③ ゲルの重合
-
調製したグリセロール入り分離ゲル溶液をプレートに注ぐ。
-
その上に調製した濃縮ゲル溶液を静かに注ぐ。
-
ゲルが固まるまで静置(約1時間)。
実験のポイント
泳動の乱れを防止するために,ゲル板の下の気泡をしっかり除去すること。
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